光度計(jì)主要是用來(lái)測(cè)量不同波長(zhǎng)的光譜，從而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。西安紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是對(duì)波長(zhǎng)在紫外光區(qū)里波長(zhǎng)的測(cè)量，測(cè)量的原理是，物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量， 相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為200～400nm的紫外光區(qū)、400～850nm的可見(jiàn)光區(qū)。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要用于對(duì)物質(zhì)的分析，與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照，比較最大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性。也可用于推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)及絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定。在外分光光度計(jì)一般都設(shè)有雙通道，其中一個(gè)通道是拿來(lái)放空白樣的，也可以說(shuō)是參比樣。操作的時(shí)候，首先是將兩個(gè)比色皿都充滿空白液，用其中一個(gè)為基準(zhǔn)調(diào)零，然后再測(cè)另一個(gè)比色皿，記下讀書(shū)，這個(gè)是空白0對(duì)應(yīng)的吸光度值，也就是由于比色皿不同帶來(lái)的誤差，在作圖的時(shí)候是要算進(jìn)去的。然后，把那個(gè)認(rèn)為是樣品的比色皿里的空白液換成真正的樣品，測(cè)量其吸光度值。通過(guò)雙通道，可以避免比色皿不同帶來(lái)的誤差。使用紫外分光光度計(jì)之前，要調(diào)零、調(diào)百校準(zhǔn)，參比溶液又稱(chēng)空白溶液。測(cè)量時(shí)用作比較的、不含被測(cè)物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時(shí)，基體中雖不含被測(cè)物質(zhì)，但含有別的物質(zhì)，這時(shí)必須保證其不影響測(cè)試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測(cè)物質(zhì)，此時(shí)必須經(jīng)過(guò)純化將其除去，否則將影響測(cè)定結(jié)果。在色譜分析中，有時(shí)基體中可能存在一個(gè)以上的和被測(cè)組分相距較遠(yuǎn)的色譜峰，計(jì)算機(jī)在數(shù)據(jù)處理中不會(huì)計(jì)入它們，不影響測(cè)定。參比溶液與測(cè)量溶液就相差鐵離子含量，在測(cè)量之前要用不含鐵離子的參比溶液掃描，調(diào)整儀器后（調(diào)100的過(guò)程），然后再測(cè)量含鐵離子溶液的比色皿，這樣測(cè)量溶液中的鐵離子會(huì)形成自己特定的峰值，次峰值與數(shù)據(jù)庫(kù)里基準(zhǔn)峰值對(duì)比就可以得出溶液所含量了。如果數(shù)據(jù)庫(kù)中沒(méi)有鐵離子的曲線，你還要自己先用不同鐵離子濃度的溶液做工作曲線，然后進(jìn)行測(cè)量。
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